2014. július 28., hétfő

C2C12 sejtvonal



C2C12 sejtvonal

A C2C12 a Yaffe és mtsai. által 1977-ben létrehozott egér vázizom eredetű myoblast sejtvonal egyik szubklónja (Yaffe & Saxel 1977, Blau et al. 1983). A sejtek a felnőtt C3H egértörzs lábának harántcsíkolt izomzatából nyert immortalizált myoblastok, melyek lószérum hatására myotubulusokat képeznek. A differenciáltatást 90%-os sejtsűrűségnél kell megkezdeni, ugyanis ezen mértékű denzitás biztosítja a sejtfúziót megelőző sejt-sejt interakció meglétét.
A myoblast tenyészet fenntartásához és a proliferációjuk elősegítéséhez a DMEM tápoldatot 10% FBS-sel, 50 U/ml penicillinnel, és 50 µg/ml streptomycinnel egészítjük ki. A kísérleteinkhez a tenyészetet izomcsövekké differenciáltatjuk, miután elérték az ehhez szükséges 80-90%-os konfluenciát. A differenciálódás elindítása a tápoldat összetételének módosításával történik, melynek során a 10% FBS-t – a többi összetevőt nem változtatva – 5% lószérumra (HS) cseréljük. A kísérleteket 5-6 napos differenciált myotubulusokon végezzük (Oláh et al. 2011).













 6 napos, terminálisan differenciálódott C2C12 myotubulusok


Irodalom:

Blau HM, Chiu CP, Webster C: Cell. 1983 Apr;32(4):1171-80.
Oláh T, Fodor J, Ruzsnavszky O, Vincze J, Berbey C, Allard B, Csernoch L: Cell Calcium. 2011 Jun;49(6):415-25.
Yaffe D, Saxel O: Nature. 1977 Dec 22-29;270(5639):725-7.






A kutatás az Európai Unió és Magyarország támogatásával, az Európai Szociális Alap társfinanszírozásával a TÁMOP 4.2.4.A/2-11-1-2012-0001 azonosító számú „Nemzeti Kiválóság Program – Hazai hallgatói, illetve kutatói személyi támogatást biztosító rendszer kidolgozása és működtetése országos program” című kiemelt projekt keretei között valósult meg.

Nincsenek megjegyzések:

Megjegyzés küldése