In vitro
erőmérés
Az
izomerő specifikusabb vizsgálatához izolált izomrostokon végzünk erőméréseket,
elektromos ingerlés hatására. E mérések során ki tudjuk küszöbölni az olyan
viselkedési és idegrendszeri eredetű hatásokat, amelyek az élő állatokkal
végzett kísérletekben befolyásolhatják a kapott eredményt.
Kontroll
és CB1 KO egerek hátsó lábaiból lassú típusú soleus és gyors típusú extensor
digitorum longus (EDL) izmokat preparálunk, majd oxigenizált Krebs oldattal
folyamatosan perfundált mérőkádba helyezzük, és kapacitív erőmérő berendezéshez
rögzítjük őket. Az izmokat platina elektródok segítségével elektromosan
stimuláljuk. Az erőválaszokat 2 kHz-en Digidata 1200 A/D kártya használatával
digitalizáljuk, az adatok tárolására Axotape szoftvert használunk. Az egyedi
izom-összehúzódások kiváltásához mindkét izomtípust 5 V-on ingereljük 2 ms-ig, EDL
esetében 0,5 Hz, soleus esetében 0,25 Hz frekvencia mellett. Az egyes izmokat 10
egyedi kontrakció amplitúdójának átlagával jellemezzük. A tetanusz kiváltásához
EDL esetében 100 Hz-en 200 ms-ig, soleus vizsgálatakor 50 Hz-en 500 ms-ig
ingereljük az izmokat, 0,25 Hz frekvenciájú, 10 db tetanuszt tartalmazó
kontrakció-sorozat segítségével. Az összehúzódások vizsgálatát követően az
izmok tömegét és átmérőjét is lemérjük.
A
mérések során kontroll és CB1-KO egerekből izolált izmokat hasonlítunk össze,
valamint a kannabinoid agonista 1 µM WIN 55,212-2 hatását is vizsgáljuk az
izomösszehúzódásokra.
Az erőmérő rendszer felépítése (felső
panel) és a mérőkarhoz rögzített soleus izom (alsó panel)
A
kutatás az Európai Unió és Magyarország támogatásával, az Európai Szociális
Alap társfinanszírozásával a TÁMOP 4.2.4.A/2-11-1-2012-0001 azonosító számú
„Nemzeti Kiválóság Program – Hazai hallgatói, illetve kutatói személyi támogatást
biztosító rendszer kidolgozása és működtetése országos program” című kiemelt
projekt keretei között valósult meg.