In vitro erőmérés

In vitro erőmérés

Az izomerő specifikusabb vizsgálatához izolált izomrostokon végzünk erőméréseket, elektromos ingerlés hatására. E mérések során ki tudjuk küszöbölni az olyan viselkedési és idegrendszeri eredetű hatásokat, amelyek az élő állatokkal végzett kísérletekben befolyásolhatják a kapott eredményt.

Kontroll és CB1 KO egerek hátsó lábaiból lassú típusú soleus és gyors típusú extensor digitorum longus (EDL) izmokat preparálunk, majd oxigenizált Krebs oldattal folyamatosan perfundált mérőkádba helyezzük, és kapacitív erőmérő berendezéshez rögzítjük őket. Az izmokat platina elektródok segítségével elektromosan stimuláljuk. Az erőválaszokat 2 kHz-en Digidata 1200 A/D kártya használatával digitalizáljuk, az adatok tárolására Axotape szoftvert használunk. Az egyedi izom-összehúzódások kiváltásához mindkét izomtípust 5 V-on ingereljük 2 ms-ig, EDL esetében 0,5 Hz, soleus esetében 0,25 Hz frekvencia mellett. Az egyes izmokat 10 egyedi kontrakció amplitúdójának átlagával jellemezzük. A tetanusz kiváltásához EDL esetében 100 Hz-en 200 ms-ig, soleus vizsgálatakor 50 Hz-en 500 ms-ig ingereljük az izmokat, 0,25 Hz frekvenciájú, 10 db tetanuszt tartalmazó kontrakció-sorozat segítségével. Az összehúzódások vizsgálatát követően az izmok tömegét és átmérőjét is lemérjük.

A mérések során kontroll és CB1-KO egerekből izolált izmokat hasonlítunk össze, valamint a kannabinoid agonista 1 µM WIN 55,212-2 hatását is vizsgáljuk az izomösszehúzódásokra.

 

 

Az erőmérő rendszer felépítése (felső panel) és a mérőkarhoz rögzített soleus izom (alsó panel)

A kutatás az Európai Unió és Magyarország támogatásával, az Európai Szociális Alap társfinanszírozásával a TÁMOP 4.2.4.A/2-11-1-2012-0001 azonosító számú „Nemzeti Kiválóság Program – Hazai hallgatói, illetve kutatói személyi támogatást biztosító rendszer kidolgozása és működtetése országos program” című kiemelt projekt keretei között valósult meg.